Selenitna juha je obogatitveni medij s selektivnimi lastnostmi, zasnovan za izolacijo patogenih bakterij iz rodu Salmonella (lat. Salmonella). Zelo učinkovito je, če je treba odkriti ta poseben patogen med drugimi predstavniki črevesne mikroflore. Medij se uporablja tako za klinično diagnostiko kot za sanitarne namene pri testiranju živil.
Splošne značilnosti
Selenite juha je pripravljena na osnovi praška, ki je homogenizirana mešanica različnih sestavin sestavka. Barva suhega materiala je lahko svetlo rumena ali smetana, odvisno od vrste medija. Prašek ima prosto tekoče lastnosti.
Pripravljena selenitna juha je tekoč prozoren medij svetlo rumene barve. To maso vlijemo v posode, kjer poteka setev za nadaljnjo inkubacijo.
Obstajajo tri glavne vrste selenitne juhe:
- čisti medij - primeren za izolacijo salmonele iz kliničnega in sanitarnega materiala;
- z dodatkom manitola (dvokomponentna juha) - zasnovano za delo samo s kliničnim materialom;
- cistein-selenitni medij - se lahko uporablja za izolacijo salmonele iz patološkega biomateriala pacienta (iztrebki, urin itd.).
Te vrste se nekoliko razlikujejo po sestavi in dejanjih.
Glavna naloga selenitne juhe je spodbujanje kopičenja salmonele in zaviranje rasti spremljajoče mikroflore. To omogoča ne samo odkrivanje patogena v materialu, ampak tudi naknadno prenos v agar. Medij je razvil Leifler, ki je prvi odkril selektivni učinek selenita proti salmoneli.
Sestava
Selenite juha vsebuje:
- kazein hidrolizat;
- laktoza;
- natrijev fosfat;
- natrijev hidroselenit.
Selenit-cistein medij poleg teh sestavin vsebuje L-cistein in natrijev hidrogenfosfat. Sestava manitolne juhe se razlikuje po tem, da namesto kazeinskega hidrolizata vključuje peptično prebavo živalskega tkiva. V takem okolju ni laktoze, je pa manitol. Slednji deluje kot fermentabilen substrat in zagotavlja puferske lastnosti juhe.
Vse sestavine prahu, razen natrijevega hidroselenita, se pogojno imenujejo del A, selektivna snov pa del B.
Načelo delovanja in lastnosti okolja
Selenite juha deluje kot medij za shranjevanjes selektivnim delovanjem. Selektivni učinek je zagotovljen zaradi toksičnosti selenita, ki zavira rast večine mikroorganizmov. Hkrati lahko bakterije iz rodu Salmonella obnovijo to spojino in s tem odpravijo toksični učinek na lastne celice. Vendar pa kot posledica reakcije nastane alkalija, ki zmanjša škodljiv učinek selenita na rast povezane mikroflore, zato je treba stabilizirati pH. To funkcijo opravljajo bakterije, ki fermentirajo laktozo s tvorbo kisline. Puferiranje medija zagotavlja fosfat.
V dvokomponentni juhi se pH stabilizira z manitolom. Cisteinsko medij izboljša selektivni učinek proti salmoneli. Takšna juha je učinkovita za obvladovanje infekcijskega ozadja pri bolnikih z neakutnim stadijem bolezni ali pri rekonvalescentih.
Manifestacijo značilnosti rasti referenčnih sevov v mediju lahko opazimo po 12-24 urah od začetka inkubacije. V tem primeru salmonela tvori brezbarvne kolonije.
funkcije kuhanja
Priprava medija poteka v dveh fazah. Najprej pripravimo raztopino s selektivno komponento s hitrostjo 4 g natrijevega selenita na liter destilirane vode. Nato dodajte 19 gramov glavnega prahu (del A). Raztopino temeljito premešamo in segrevamo, dokler se delci popolnoma ne raztopijo, nato pa jo vlijemo v sterilne epruvete.
Pri kuhanju je pomembno sledititemperaturni režim, saj je medij nestabilen na pregrevanje. Sterilizacija juhe se lahko izvaja samo v vodni kopeli ali s curkom pare. Avtoklaviranje medija je strogo prepovedano.
