Izraz "mikroskopija" ima grške korenine. V prevodu pomeni preučevanje predmetov z uporabo visoko preciznih instrumentov. V zadnjem času sta vse bolj priljubljeni fluorescenčna in elektronska mikroskopija.
Resolucija
Pod njim praviloma razumejo najmanjšo razdaljo, na kateri se lahko nahajajo jasno razločljivi predmeti. Stopnja prodora v mikroskopski svet, sposobnost upoštevanja velikosti preučevanega elementa bo odvisna od ločljivosti opreme. Pri veliki povečavi se lahko meje predmetov združijo. V skladu s tem obstajajo določene meje, preko katerih je približevanje elementov nesmiselno.
Metoda luminiscenčne mikroskopije: mehanizem
Ko se energija, ki jo absorbira snov, pretvori v vidno sevanje, se pojavi sij. Imenuje se luminiscenca. Ta pojav je posledica dejstva, da nekatere snovi pod vplivom svetlobe začnejo oddajati žarke z drugačno (običajno veliko) valovno dolžino. Poleg tega imajo nekateri predmeti, ki ob normalni osvetlitvi določenobarve, pod vplivom ultravijoličnega sevanja spremenijo barvo.
posebnosti
Predmet, ki ga ni mogoče videti pod ultravijolično svetlobo, lahko oddaja svetel lesk, če ga obdelamo s posebno snovjo. V njej se elementi v temi svetijo v različnih barvah. Moč sevanja je različna, vendar je praviloma majhna. V zvezi s tem je fluorescenčna mikroskopija učinkovita v zatemnjenem prostoru. Pri uporabi te vrste študija se predmet gleda v svetlobi, ki jo sam oddaja. Kemična sestava tkiv, celic bo vplivala na kakovost študije. Fluorescenčna mikroskopija je do določene mere histokemična študija.
Razvrstitev
Fluorescenčna mikroskopija je lahko primarna ali sekundarna. V slednjem primeru je predmet obdelan s posebnimi spojinami, ki dajejo sijaj. Primarna fluorescenčna mikroskopija temelji na lastni sposobnosti elementa, da oddaja svetlobo.
Oprema
Fluorescenčna mikroskopija se izvaja z različnimi napravami. Njihov glavni element je osvetljevalec. Opremljen je z UV žarnico. Poleg tega naprave uporabljajo nabor filtrov. V nekaterih napravah je precej različnih konfiguracij. Glede na to, katera barva se uporablja za vzbujanje luminiscence – ultravijolična ali modra, se med vir svetlobe in preučevanim predmetom postavi ustrezen filter. Ker je sij mikroskopskega elementa energijsko šibkejši od vznemirljive svetlobe, bo zajet le pod enim pogojem. Odvečne žarke iz vira je treba odrezati z rumeno-zelenim filtrom. Nahaja se na okularju naprave. Najbolj izrazit učinek luminiscence bo, ko filter popolnoma odseče žarke, ki izhajajo iz vira svetlobe.
Iz česa je sestavljena instalacija vidne svetlobe? Vsebuje svetel vir svetlobe in biološki mikroskop. Med ogledalo naprave in svetilko je nameščen modro-vijolični filter. Lahko je FS-1, UFS-3 in tako naprej. Rumeni filter se namesti na okular mikroskopa. Z njihovo pomočjo na predmet pade modro-vijolična svetloba. Vzbuja luminiscenco. Toda ta svetloba lahko moti videnje sijaja. Zato ga na poti do očesa odreže rumen filter. Osvetlitev je nastavljena po Koehlerjevi metodi, z eno izjemo. Membrana kondenzatorja mora biti popolnoma odprta. Pri pregledu je pomembno, da uporabite nefluorescenčno potopno olje. Za zmanjšanje lastnega sijaja se mu doda nitrobenzen (2-10 kapljic / 1 g).
Luminiscenčna mikroskopija: aplikacije v mikrobiologiji
Prednosti te vrste študija so:
- Zmogljivost barvnega slikanja.
- Visokokontrastni samosevajoči elementi na črnem ozadju.
- Odkrivanje in lokalizacija nekaterih vrst virusov in mikrobov.
- Zmožnost študija preglednega in neprozornegaživi organizmi.
- Študij življenjskih procesov v njihovi dinamiki.
Treba je reči tudi, da luminiscenčna mikroskopija prispeva k razvoju najboljših metod histo- in citokemije, ekspresne diagnostike.
