Sodobna medicina ima posebne diagnostične metode, ki omogočajo ugotavljanje etiologije bolezni pri človeku na podlagi opredelitve povzročitelja, genetsko tujih snovi, ki spodbujajo imunski odziv, nukleinskih kislin ter alergijskih in imunskih sprememb ki nastanejo zaradi njegovih dejanj. Danes se RIA pogosto uporablja v imunologiji in virologiji, to je radioimunski test, cilje postavitve, sestavine, potek, katerih računovodstvo bomo obravnavali v tem članku. Ta test lahko odkrije antigene kot rezultat njihove interakcije s protitelesi.
Definicija
RIA je metoda za diagnosticiranje biološko aktivnih snovi v tekočinah, ki temelji na reakciji antigenov s protitelesi pri uporabi radionuklidno označenih analognih snovi, ki imajo posebne sisteme vezave. Po njuni interakcijinastane imunski kompleks, ki ga ločimo in preučimo njegovo radioaktivnost. Znano je, da se radioimunski test izvaja s standardnimi kompleti reagentov.
Vsak reagent lahko določi koncentracijo ene specifične snovi. Biološko tekočino, odvzeto osebi, zmešamo z reagentom, po inkubacijski dobi se ločijo proste in vezane radioaktivne snovi, nato se izvede radiometrija in izračunajo rezultati. Za označevanje snovi se uporablja izotop joda. Označena je in dodana v določeni količini.
Prijava
Radioimunska analiza ima široko uporabo v medicini in mikrobiologiji. Uporablja se za diagnosticiranje bolezni srca in ožilja, bolezni endokrinega in drugih telesnih sistemov. RIA se pogosto uporabljajo tudi za prepoznavanje vzroka neplodnosti, patologije razvoja ploda. V onkologiji se ta analiza izvaja za določitev markerjev novotvorb, da bi lahko spremljali učinkovitost zdravljenja. V imunologiji se RIA uporablja za preučevanje prisotnosti imunoglobulinov, encimov, beljakovin in tako naprej v krvi. Danes vam ta analiza omogoča odkrivanje koncentracije različnih hormonov do milijoninke enega grama. Tako se radioimunska analiza krvi pogosto uporablja v kardiologiji, onkologiji, endokrinologiji, ginekologiji in virologiji.
RIA metode
Običajno je razlikovati med več metodami analize, odvisno od naravereakcije:
- Za nekonkurenčno metodo so značilne takšne reakcijske komponente, kot so standardni in zaznavni antigeni, puferska raztopina, izotopsko označena protitelesa, nekatera protitelesa, ki se vežejo na sorbent. Protitelesom, ki jih je treba testirati, se doda antigen. Po inkubaciji se pojavijo kompleksi antigen-protitelo, sorbent izperemo, dodamo označena protitelesa, ki se vežejo na antigen v kompleksu. Radioaktivnost je odvisna od koncentracije testiranega antigena.
- Konkurenčni radioimunski test poganja konkurenca antigenov. Tu so komponente reakcije, kot so kontrolni in določeni antigeni, puferska raztopina, določena protitelesa, ki se vežejo na sorbent, pa tudi antigen, označen z izotopom. Diagnoza se začne z uvedbo antigena, ki se preiskuje. Na sorbentu nastane kompleks antigen-protitelo. Nato sorbent speremo in injiciramo označeni antigen. Pri tem se veže na protitelo. S pomočjo števcev se meri reakcija in količina radioaktivnosti. To bo v obratnem sorazmerju s količino antigena v vzorcu.
- Posredna metoda je najpogostejša. V tem primeru ima radioimunski test reakcijske komponente, kot so kontrolni in testni serum, antigeni ali protitelesa, ki so vezana na sorbent, protitelesa, označena z izotopi, puferske raztopine. Protitelesa ali antigeni, ki so diagnosticirani, reagirajo z antigeni ali protitelesi, ki so vezana na sorbent. Nato inkubat odstranimo, injiciramo označena protitelesa, ki se vežejo nakompleksi antigen-protitelo.
metodologija analize
Torej, radioimunski test se izvaja s posebnimi reagenti. Kompleti so standardni, zato kakršne koli napake ali kršitve niso dovoljene. Diagnostični rezultati so zanesljivi. Analiza se opravi zjutraj, za to osebi odvzamejo vensko kri. V laboratoriju se serum loči od krvi, ki jo bomo uporabili za RIA. Ta serum se zmeša z reagenti. Dobljeno zmes inkubiramo pri določeni temperaturi v termostatu.
Prosti in vezani izotopi se ločijo v nastali zmesi. Po tem se prejeti material pregleda in rezultati izračunajo. Mehanizem radioimunskega testa ima več možnosti. Zgoraj opisana tehnika je RIA v tekoči fazi, saj so vse komponente v tekočem stanju. Obstaja RIA in trdna faza, kjer so protitelesa nameščena v nosilec, ki se ne raztopi v tekočini.
Razpoložljivost diagnostike
Uporaba te diagnostične metode v medicini je vsako leto vse bolj priljubljena. Radioimunski test je v zadnjem času postala standardna diagnostična metoda, ki jo lahko predpiše zdravnik ob postavitvi končne diagnoze. Dolgo časa so to vrsto analize izvajali le v laboratorijih, danes pa je postala običajna raziskovalna metoda. Toda RIA zahteva uporabo drage opreme (gama števci), kompleti reagentov pa imajo kratko življenjsko dobo. Vse to je glavna pomanjkljivost takšne analize, ki določa njenodragi stroški.
Poleg tega je RIA pred kratkim začela izpodrivati sodobnejše raziskovalne metode, ki ne zahtevajo interakcije z izotopi. Ti vključujejo encimski imunski test. Tako je RIA zaželena v mnogih klinikah. Že dolgo se uporablja v velikih mestih in diagnostičnih centrih, vendar se v navadnih bolnišnicah v majhnih mestih ta analiza praktično ne uporablja zaradi visokih stroškov.
Dostojanstvo RIA
Radioimunski test ima številne prednosti. Je precej specifičen in ima visoko občutljivost, zaradi česar je mogoče določiti prisotnost biološko aktivnih snovi v neverjetno majhnih količinah. Ta analiza se izvaja zelo preprosto, oseba mora samo darovati vensko kri. Rezultati testov so 100% točni in pripravljeni že naslednji dan. RIA je mogoče tudi enostavno avtomatizirati. Tako vam ta analiza omogoča identifikacijo beljakovin, ki so odpadni produkti nalezljivih bakterij, kar kaže na prisotnost okužbe v telesu.
Diagnoza v virologiji
Najbolj obetavna RIA je za virologijo, saj omogoča hitro prepoznavanje virusnih patogenov. To je posledica dejstva, da v zadnjih letih narašča pojavnost različnih okužb, ki se širijo z veliko hitrostjo in povzročajo umrljivost ljudi. To še posebej velja za države, ki nimajo visokedružbenega in gospodarskega razvoja (države Daljnega vzhoda), je radioimunski test tukaj preprosto nepogrešljiv. Mikrobiologija uporablja to diagnostično metodo tudi za odkrivanje nalezljivih bolezni, ki jih povzročajo patogene bakterije. Na primer, RIA se pogosto uporablja za odkrivanje tifusne mrzlice. V prvih dneh bolezni, pred imenovanjem zdravljenja, je treba opraviti študijo blata in bruhanja. Vendar pa bodo rezultati diagnostike doseženi po dolgem času. Tu na pomoč priskoči RIA, analiza vam omogoča, da v kratkem času prepoznate povzročitelja bolezni. Oseba daruje kri, naslednji dan so rezultati študije pripravljeni. Ta analiza pomaga pri postavitvi natančne diagnoze.
Rezultati
Radioimunski test je trenutno ena najbolj občutljivih diagnostičnih metod. Uporablja se za analizo katere koli snovi, proti kateri je mogoče pridobiti protitelesa. Ta metoda omogoča izdelavo številnih vzorcev v najmanjši prostornini preiskovane tekočine ter zapisovanje rezultatov v najkrajšem možnem času, saj je lahko popolnoma avtomatizirana. To analizo je v petdesetih letih prejšnjega stoletja razvil Solomon Burson. Trideset let pozneje je postala razširjena. Do danes ni stoodstotne alternative RIA, saj ima analiza visoko občutljivost. RIA se uporablja v različnih vejah medicine, pa tudi v mikrobiologiji in virologiji.
Končno
Uporaba metode v virologiji je danes zelo aktualna, saj dajesposobnost raziskati širjenje okužb, postaviti natančno diagnozo in predpisati specifično zdravljenje. Ta problem je še posebej pomemben za države z nizko gospodarsko in družbeno razvitostjo. Prav tako vam ta analiza omogoča odkrivanje količine hormonov in encimov v človeškem telesu. Za pridobitev zanesljivih rezultatov mora raziskovalec samo darovati kri za analizo. Medicina ne miruje, skupaj z radioimunskim testom se pojavljajo nove raziskovalne metode, vendar je RIA še naprej eden vodilnih v medicinski diagnostiki.
